Cysticercus ELISA Test dùng cho tầm soát định tính kháng thể IgG kháng Taenia solium trong huyết thanh với kỹ thuật miễn dịch hấp thụ liên kết enzyme (ELISA) để chẩn đoán bệnh ấu trùng sán gạo heo. Phương pháp này chỉ cần dùng một lượng nhỏ huyết thanh tách từ máu, rồi dùng bộ kit và hóa chất chất lượng uy tín hàng đầu của Mỹ để tiến hành làm xét nghiệm cho ra kết quả chính xác.

VẬT LIỆU VÀ THÀNH PHẦN

Vật liệu được cung cấp cùng với bộ xét nghiệm ELISA

Khay vi giếng: chứa kháng nguyên T.solium – 96 giếng trong một khung giữ thanh vi viếng.

Enzyme Liên hợp: Một (1) chai chứa 11ml Protein A liên hợp với peroxidase.

Chứng dương: Một (1) lọ chứa 1 ml huyết thanh thỏ dương tính pha loãng.

Chứng âm: Một (1) lọ chứa 1 ml huyết thanh người âm tính được pha loãng.

Dung dịch Cơ chất TMB: Một (1) chai chứa 11 ml chất tạo màu tetramethylbenzidine (TMB).

Dịch Rửa đậm đặc 20X: Một (1) chai chứa 25ml dung dịch đệm và chất hoạt tính bề mặt đậm đặc.

Đệm Pha loãng: Hai (2) lọ chứa 30 ml dung dịch dung dịch protein đệm.

Dung dịch Dừng phản ứng: Một (1) chai chứa 11 ml dung dịch 1 M axit photphoric

QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM

1. Bẻ ra số giếng cần thiết (hai cho đối chứng cộng với số lượng mẫu) và đặt trong khung giữ thanh vi giếng.
2. Nhỏ chứng âm vào giếng 1, chứng dương vào giếng 2 và 100 µl mẫu xét nghiệm đã pha loãng (1:64) vào các giếng còn lại.
3. Ủ ở nhiệt độ phòng (15-25 ºC) trong 10 phút.
4. Lắc đều và rửa 3 lần với đệm rửa đã pha loãng.
5. Thêm 2 giọt enzyme Liên hợp vào mỗi giếng.
6. Ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút.
7. Lắc đều và rửa 3 lần với đệm rửa. Đập giếng lên khăn giấy để loại bỏ nước còn sót lại.
8. Thêm 2 giọt chất tạo màu vào mỗi giếng.
9. Ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút.
10. Thêm 2 giọt Dung dịch Dừng phản ứng và trộn bằng cách đảo khung giữ vi giếng.

KẾT QUẢ

Nhìn bằng mắt thường: Nhìn vào mỗi giếng trên nền khăn giấy trắng và ghi nhận là không phản ứng, +, ++ hoặc +++.

Máy đọc ELISA: dùng máy ELISA đo chỉ số kháng thể bằng đơn vị OD

Dương tính: kết quả đọc hấp thụ bằng hoặc lớn hơn 0,3 đơn vị OD.

Âm tính: kết quả đọc hấp thụ nhỏ hơn 0,3 đơn vị OD.

Kết quả OD dương tính chỉ ra rằng bệnh nhân có thể bị nhiễm T. Solium bệnh ấu trùng sán gạo heo hoặc một sinh vật có liên quan (VD. Echinococcus).

Kết quả OD âm tính là không nhiễm bệnh.

Giải thích Kết quả đọc bằng mắt

So sánh kết quả với các thuốc chứng. Một mẫu nên được hiểu là dương tính nếu độ tạo màu rõ ràng và đáng kể.

KTV. KHƯƠNG VY